体细胞基因编辑肿瘤模型
SOMATIC GENE EDITING TUMOR MODELS
肿瘤模型的构建是癌症机制研究和新药开发的关键环节。传统方法如基因敲除鼠、异种移植模型(CDX/PDX)存在周期长、成本高、与人体肿瘤微环境差异大等问题。针对这些痛点，守正弘药自主研发了"体细胞基因编辑肿瘤模型"技术（专利申请号:202311028166X），通过创新性优化质粒递送和基因组整合策略，大幅提升模型构建效率与成功率，为肿瘤研究提供更快速、更可靠的实验工具。
模型介绍
肿瘤动物模型是用来模拟人类肿瘤在动物体内的发生、发展和治疗反应的实验动物，被广泛应用于肿瘤学研究，包括了解肿瘤的生物学特性、疾病机制、药物筛选和治疗效果评估等方面。常用的动物肿瘤模型包括：移植瘤模型（同种移植、异种移植和PDX）、诱导肿瘤模型（物理、化学和生物因素诱导）、自发肿瘤模型和基因编辑肿瘤模型。基因编辑肿瘤模型遗传背景清晰、类似人体内肿瘤的发生过程，因此备受研究者青睐。最常见的基因编辑肿瘤模型为在受精卵或胚胎干细胞中敲入癌基因或者敲除抑癌基因从而诱发肿瘤。如肠癌APC-Min、乳腺癌MMTV-PyMT等模型。传统基因编辑动物存在成瘤慢（3-6个月）、成瘤率不稳定、繁育周期长、价格高昂、均一性差等问题。
最常见的基因编辑肿瘤模型为在受精卵或胚胎干细胞中敲入癌基因或者敲除抑癌基因从而诱发肿瘤。如肠癌APC-Min、乳腺癌MMTV-PyMT等模型。传统基因编辑动物存在成瘤慢（3-6个月）、成瘤率不稳定、繁育周期长、价格高昂、均一性差等问题。
肿瘤模型构建及检测服务
大量研究表明存在一种专门制作肝癌的基因编辑肿瘤模型，通过尾静脉快速注射大体积的质粒溶液诱导肝癌发生。这是因为由于注射体积过大、速度过快，超出了心脏能承受的输血量，使得肝门静脉压力增大。过大的血压加上肝脏松软的结构，使得溶液快速流入肝脏（下图左）。质粒通过囊泡内吞或者细胞膜孔进入细胞质，然后通过核孔进入细胞核。质粒溶液中包含一个有编码转座酶的质粒和另外一个或两个携带癌基因/抑癌基因干扰序列转座子的质粒，转座酶表达后将癌基因/抑癌基因干扰序列插入到染色体上实现长期表达，最终诱发肝癌发生。
大量研究表明存在一种专门制作肝癌的基因编辑肿瘤模型，通过尾静脉快速注射大体积的质粒溶液诱导肝癌发生。这是因为由于注射体积过大、速度过快，超出了心脏能承受的输血量，使得肝门静脉压力增大。过大的血压加上肝脏松软的结构，使得溶液快速流入肝脏（下图左）。质粒通过囊泡内吞或者细胞膜孔进入细胞质，然后通过核孔进入细胞核。质粒溶液中包含一个有编码转座酶的质粒和另外一个或两个携带癌基因/抑癌基因干扰序列转座子的质粒，转座酶表达后将癌基因/抑癌基因干扰序列插入到染色体上实现长期表达，最终诱发肝癌发生。
转座子（transposon，Tn）又称为“跳跃基因”，是指一类可以在基因组中不同位置移动的DNA序列。睡美人（Sleeping Beauty，SB）转座子系统由SB转座酶（催化移位）和转座子（可在基因组移位）组成。可将特定的DNA序列插入脊椎动物的基因组中。DNA转座子以剪切/粘贴的方式，将一条DNA片段转移到另一条DNA片段上。SB转座子由一组镜像的反向重复序列组成，位于质粒骨架中目的基因的两侧。一个单独的质粒含有转座酶基因，用于表达转座酶。SB转座酶表达并结合反向重复序列；然后发生切割DNA的内切酶反应，使DNA中产生双链断裂，并允许转座子整合到目的细胞基因组中。
技术原理
我司借鉴高压尾静脉注射诱导肝癌原理发明了一种直接注射包含癌基因/抑癌基因的质粒溶液，从而模拟动物自然发生肿瘤的模型构建方法（申请号：202311028166X）。通过一次性快速注射大量（质量）质粒溶液到器官的浆膜层并产生鼓包，相当于增加了一定压力，使细胞受损，增强了细胞对质粒的吸收能力，质粒通过囊泡内吞或者细胞膜孔进入细胞。质粒溶液中包含一个编码Sleeping Beauty转座酶的质粒和一个或两个携带癌基因转座子的质粒，转座酶表达后将癌基因随机插入到染色体上实现长期表达，最终诱导正常细胞发生癌变形成肿瘤。
造模方法
将癌基因序列/抑癌基因抑制序列构建到含有转座酶识别位点的表达质粒上得到目的基因质粒；
将构建的目的基因质粒以单个或多个组合与转座酶质粒按一定比例混合在特定溶液中；
将混合好的质粒组合溶液通过原位注射到动物待造模器官/组织内；
数周后可在造模器官或组织内注射部位形成原位原发肿瘤。
优势分析
此模型可模拟动物体内由于遗传改变导致正常细胞向肿瘤细胞转化的过程，能动态地表征肿瘤发生发展的过程，在基因层面、肿瘤微环境、肿瘤发展及病理生理等方面与肿瘤发生发展真实情况更加贴近。并且该构建方式具备效率高、耗时短、成本低、成瘤率高、可大量制备等优点，可以为科研人员节省大量时间和经费。该模型为探究肿瘤发生发展机制、寻找和优化新的肿瘤治疗方法提供了有利工具。
成瘤快
最快2-3周成瘤，采用创新技术，大幅缩短试验周期
通量大
成瘤率大于95%，
远高于常规方法
远高于常规方法
现货多
无需繁育，现货供应充足，支持大批量实验需求
差异小
均一性较好，确保实验重复性和数据可比性，提升效率
原位瘤
器官原位自发成瘤，癌基因转染器官内正常细胞后，诱发组织发生癌变
模型肿瘤展示
- AKT/MYC 双基驱动的大鼠原位肿瘤模型
- 肝癌小动物成像
- Nras（G12V）/Myc-Luc 组合活体成像
- 不同高压尾静脉注射的小鼠原位肝癌模型
- AKT/MYC 双基因驱动的小鼠原位肿瘤模型
肿瘤相关基因编辑质粒库（可定制）
做动物实验 找守正弘药
技术服务热线
19086384230
联系我们
技术咨询：19086384230
招商合作：19086384230
实验基地：湖北省鄂州市东湖高新智慧城11栋、3期14栋、葛店中小企业创业园
关注我们
咨询实验服务
学习实验操作